化學發(fā)光分析儀是利用化學反應(yīng)產(chǎn)生的光輻射進行分析的儀器。它的工作原理基于化學發(fā)光現(xiàn)象,即在某些化學反應(yīng)中,反應(yīng)物或產(chǎn)物在從激發(fā)態(tài)返回到基態(tài)時會發(fā)射出光子,從而產(chǎn)生光輻射。這種光輻射的強度與反應(yīng)物的濃度成正比,通過測量光輻射的強度,可以對反應(yīng)物進行定量分析。
化學發(fā)光是指在某些化學反應(yīng)中,反應(yīng)物或產(chǎn)物在從激發(fā)態(tài)返回到基態(tài)時發(fā)射出光子的現(xiàn)象。這種現(xiàn)象的產(chǎn)生需要滿足兩個條件:一是反應(yīng)物或產(chǎn)物必須處于激發(fā)態(tài);二是激發(fā)態(tài)的物質(zhì)在返回基態(tài)時能夠發(fā)射光子。根據(jù)化學發(fā)光的來源,可以分為直接化學發(fā)光和間接化學發(fā)光兩種類型。
-直接化學發(fā)光:在這種類型的化學發(fā)光中,反應(yīng)物或產(chǎn)物本身具有發(fā)光特性,如魯米諾(luminol)與過氧化氫(H2O2)的反應(yīng)。魯米諾在堿性條件下與H2O2反應(yīng)生成激發(fā)態(tài)的3-氨基鄰苯二甲酸根離子,當這個激發(fā)態(tài)離子返回基態(tài)時發(fā)射出藍光。
-間接化學發(fā)光:在這種類型的化學發(fā)光中,反應(yīng)物或產(chǎn)物本身不具有發(fā)光特性,但它們可以通過能量轉(zhuǎn)移的方式將能量傳遞給具有發(fā)光特性的受體分子,使受體分子發(fā)射光子。例如,某些生物體內(nèi)的酶促反應(yīng)會產(chǎn)生激發(fā)態(tài)的中間產(chǎn)物,這些中間產(chǎn)物可以通過能量轉(zhuǎn)移的方式將能量傳遞給熒光素,使其發(fā)射光子。
化學發(fā)光分析儀主要由以下幾個部分組成:
-光源:用于提供穩(wěn)定的激發(fā)光,通常采用LED或激光器作為光源。
-樣品池:用于放置待測樣品和試劑的容器,通常采用石英或玻璃材料制成。
-光電探測器:用于檢測化學反應(yīng)產(chǎn)生的光輻射,常見的光電探測器有光電二極管(PD)、光電倍增管(PMT)和電荷耦合器件(CCD)等。
-信號處理系統(tǒng):用于將光電探測器檢測到的光信號轉(zhuǎn)換為電信號,并進行放大、濾波、模數(shù)轉(zhuǎn)換等處理,得到與反應(yīng)物濃度成正比的信號。
-控制系統(tǒng):用于控制整個分析過程,包括樣品的加入、反應(yīng)條件的控制、信號采集和數(shù)據(jù)處理等。